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技術(shù)文章

ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)束后標(biāo)曲怎么繪制,樣本濃度怎么核算

點(diǎn)擊次數(shù):2989   發(fā)布時(shí)間:2022/3/10 13:58:44

 實(shí)驗(yàn)雖然結(jié)束,但重要的工作還是如何把 OD 值轉(zhuǎn)化為濃度,以達(dá)到分析數(shù)據(jù)的目的。

通常,推薦使用門的曲線擬合工具繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線 curve Exert1.4

點(diǎn)擊可以直接下載 curve Exert1.4 軟件 戳↓↓↓

http://www.fn-test.com/services/software-download/ for more information

1.啟動(dòng)「Curve Expert1.4」。
 

2.X 軸輸入所對(duì)應(yīng)的濃度值,Y 軸輸入標(biāo)準(zhǔn)品的 OD 值。如圖↓



3.單擊 [運(yùn)行]    按鈕,出現(xiàn)如下對(duì)話框。


4.單擊 [ok] 按鈕,出現(xiàn)如下兩個(gè)對(duì)話框,關(guān)閉下面一個(gè)對(duì)話框。



5. 在對(duì)話框的右上角出現(xiàn)一些曲線的名稱,從「1」開始依次點(diǎn)擊曲線名稱,在右下角會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)擬合的曲線。


6. 根據(jù)擬合的曲線選取 ELISA 擬合度較的曲線雙擊,出現(xiàn)如下對(duì)話框。

注意:選擇系數(shù)(即「r」值)較的曲線方程來進(jìn)行運(yùn)算。在上面的對(duì)話框右上角有「r」值 ,當(dāng)「r」值越接近 1,擬合度越好。

 

7.按 [Ctrl] 鍵+[L] 鍵或者右鍵單擊選擇 [analyze],出現(xiàn)如下對(duì)話框。


8. Y 軸輸入對(duì)應(yīng)的樣本 OD 值,單擊 [Calculate] 按忸,即可得到待測(cè)蛋白的實(shí)際含量。


9. 如果出現(xiàn) , 可以調(diào)節(jié)相應(yīng)的  值,即根據(jù)預(yù)測(cè)的 X 結(jié)果,選擇附近的數(shù)值即可。


10. 如想得到 ELISA 擬合曲線的方程,可在步驟 6 的對(duì)話框空白處右擊,選擇「Information」,得到如下對(duì)話框:點(diǎn)擊「Copy」。


11. 在你需要的位置粘貼即可得到如下數(shù)據(jù):

MMF Model:y =(a*b+c*x^d)/(b+x^d)

Coefficient Data:

a = 5.02803575349E-002

b = 3.54849086120E+002

c = 2.67845070065E+000

d = 1.19812203348E+000

原創(chuàng)作者:武漢菲恩生物科技有限公司

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